Desarrollo y validación de técnicas analíticas para la determinación de biomarcadores sanguíneos en ensayos preclínicos. ¿Por qué y para qué? / Development and validation of analytical techniques for the determination of blood biomarkers in preclinical trials. Why and what for?

Resumen El descubrimiento de un nuevo principio activo farmacéutico implica estudios preclínicos, que tienen como objetivo demostrar que es eficaz y seguro para un posterior ensayo en seres humanos. Esto conduce a la necesidad de desarrollar tecnologías que aprovechen las nuevas herramientas analíticas disponi bles dentro de un contexto donde los resultados de las pruebas realizadas, estén plenamente documentados, bajo sistemas de buenas prácticas de laboratorio auditables. En esta revisión se actualizan y describen algunos de los ensayos realizados en la etapa preclínica del desarrollo de un nuevo fármaco y el estado actual de la tecnología analítica empleada para el dosaje de diferentes biomarcadores sanguíneos de interés. Se analizaron los biomarcadores más relevantes, las normativas de validación de las técnicas analíticas empleadas para su determinación y los problemas que se presentan al tratar de aplicarlas.

Abstract New drug discovery involves preclinical studies to demonstrate its effectivity and safety for further tests in humans. This leads to the need to develop technologies that take advantage of the new analytical tools available within a context where the results of the tests carried out are fully documented, under auditable systems of good laboratory practice. This review updates and describes some of the tests carried out in the preclinical stage of the development of a new drug and the current state of the analytical technology used to measure different blood biomarkers of interest. Biomarker parameters were analyzed at the physiological level, considering both the validation regulations of the analytical techniques used for their determination as the problems that arise when trying to apply them, since many of these biomarkers are endogenous compounds in the used matrices.

Sistema de Laboratorios Remoto para el estudio de la Microbiología y Parasitología Médica / Remote Laboratory System for the study of Medical Microbiology and Parasitology

Introducción: como parte del proceso de formación de enfermeros, médicos y tecnólogos de la salud son habilitados temas relacionados con la microbiología. Sin embargo, a partir del conjunto de medidas de seguridad y la disponibilidad de recursos físicos, no es posible el estudio de diversos microorganismos. Objetivo: desarrollar un Sistema de Laboratorios Remoto para la práctica de Microbiología y Parasitología Médica. Materiales y métodos: el sistema de Laboratorios Remoto posee un microscopio electrónico controlado mediante una interface de comunicación con un ordenador conectado a la red. Resultados: se obtuvo como resultado un Sistema de Laboratorios Remoto que puede ser accedido mediante Internet o la red institucional. Facilita el estudio y la interpretación de diferentes muestras biológicas. Brinda un conjunto de reportes y estadísticas que permiten realizar análisis históricos de comportamiento. Conclusiones: a partir del desarrollo de las prácticas de laboratorios a distancia, es posible el estudio de diferentes microorganismos sin riesgos biológicos para el estudiante(AU)

Introduction: as part of the training process for nurses, physicians and health technologists, topics related to microbiology are enabled. However, based on the set of security measures and the availability of physical resources, the study of various microorganisms is not possible. Objective: to develop a Remote Laboratory System for the practice of the subject Medical Microbiology and Parasitology. Methods: the Remote Laboratory System has an electronic microscope controlled by a communication interface with a computer connected to the network. Results: a Remote Laboratory System that can be accessed through the Internet or the institutional network. The system facilitates the study and interpretation of different biological samples and also provides a set of reports and statistics that allow for historical behavior analysis. Conclusions: from the development of remote laboratory practices, it is possible to study different microorganisms without biological risks for the student(AU)

Aseguramiento de Calidad en el Laboratorio de Biología Molecular: Control de Contaminación Ambiental / Quality Assurance in the Laboratory of Molecular Biology: Control of Environmental Contamination / Garantia de Qualidade no Laboratório de Biologia Molecular: Controle da Contaminação Ambiental

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la técnica más importante en Biología Molecular. Su principal deficiencia es la susceptibilidad a la contaminación de la muestra, ya sea con productos de amplificación generados en reacciones previas o con material genético proveniente de otras muestras. Se entiende por contaminación a la presencia indeseada de moléculas de ADN o ARN, que pueden actuar como templados en reacciones de amplificación. El objetivo del trabajo fue demostrar la importancia de la implementación de un control de contaminación ambiental periódico monitoreando la integridad del circuito de PCR. Para ello, se hisoparon puntos correspondientes a diferentes áreas de trabajo y se investigó la presencia de amplicones mediante PCR Real Time en Lighcycler 2.0, Roche® y Ampliprep Cobas s201, Roche®. En puntos críticos del circuito (flujo laminar o la cabina de seguridad del área de pre-PCR) no se detectaron amplicones, aunque sí se hallaron en las mesadas y heladeras. En el resto del circuito, la distribución de los amplicones fue variable. De esta forma se demuestra la importancia de la realización de un control de contaminación ambiental periódico en laboratorios que realizan la técnica de PCR, pudiendo detectar contaminación de forma precoz y tomar acciones correctivas a tiempo.

Polymerase chain reaction (PCR) is the most important technique in Molecular Biology. Its main deficiency is susceptibility to contamination of the sample, either with amplification products generated in previous reactions or with genetic material from other samples. Contamination is understood as the undesired presence of DNA or RNA molecules, which may act as annealing in amplification reactions. The objective of this work is to demonstrate the importance of implementing a periodic environmental pollution control by monitoring the integrity of the PCR. To do this, different areas of work were swabbed and the presence of amplicons were investigated by Real Time PCR in Lighcycler 2.0, Roche® and Ampliprep Cobas s201, Roche®. At critical points in the circuit (laminar flow or pre-PCR area booth) no amplicons were detected, although they were found in countertops and refrigerators. In the rest of the circuit, the distribution of the amplicons was variable. Thus, the importance of conducting a periodic environmental contamination control in laboratories that perform the PCR technique is demonstrated, enabling early detection contamination and corrective actions being taken on time.

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é a técnica mais importante em Biologia Molecular. Sua principal deficiência é a suscetibilidade à contaminação da amostra, seja com produtos de amplificação gerados em reações prévias ou com material genético em reações prévias ou com material genético proveniente de outras amostras. Entende-se por contaminação a presença não desejada de moléculas de DNA ou ARN, que podem agir como temperados em reações de amplificação. O objetivo do trabalho foi demonstrar a importância da implementação de um controle de contaminação ambiental periódico monitorando a integridade do circuito de PCR. Para isso, se fez esfregaço de pontos correspondentes a diferentes áreas de trabalho e foi investigada a presença de amplicons mediante PCR Real Time em Lighcycler 2.0, Roche® e Ampliprep Cobas s201, Roche®. Em pontos críticos do circuito (fluxo laminar ou a cabine de segurança da área de pré-PCR), não foram detectados amplicons, apesar de serem encontrados nas bancadas e refrigeradores. No resto do circuito, a distribuição dos amplicons foi variável. Assim mostra a importância da realização de um controle de contaminação ambiental periódico em laboratórios que realizam a técnica de PCR, podendo detectar a contaminação de forma precoce e tomar ações corretivas a tempo.

Las prácticas de laboratorio: una estrategia didáctica en la construcción de conocimiento científico escolar

El presente artículo es resultado de una investigación realizada en el año 2012, cuyo objetivo principal es utilizar las prácticas de laboratorio como una estrategia didáctica que desde el paradigma constructivista promueva la construcción de conocimiento científico escolar El enfoque metodológico de la investigación es cualitativo. La muestra de estudio constó de ocho estudiantes de grado undécimo, escogidos aleatoriamente. Se ejecutaron cuatro momentos en la metodología, en el primero se realizaron test para identificar las ideas previas de los estudiantes; en el segundo se diseñaron guías y prácticas de laboratorio teniendo en cuenta los niveles de abertura, posteriormente se hizo la aplicación de las mismas y en el último momento se estableció el análisis cualitativo correspondiente. Como resultado se evidenció que en el desarrollo de las prácticas la motivación y el interés durante el proceso eran mayores en los estudiantes, lo cual contribuyó al desarrollo de ciertas habilidades científicas. Los resultados del post test fueron significativos, se logró fortalecer en los educandos las destrezas y la comprensión de los conceptos relacionados con la temática de reacciones químicas. De la investigación se puede concluir que las prácticas de laboratorio, concebidas como una estrategia didáctica para la enseñanza y aprendizaje de las reacciones químicas, permitió el desarrollo de algunas habilidades científicas y un aprendizaje más significativo de los conceptos asociados con la temática en los estudiantes.

This article is the result of an investigation conducted in 2012, whose main objective is to use the labs as a teaching strategy from the constructivist paradigm that promotes the construction of school scientific knowledge. The methodological approach is qualitative research. The study sample group contained 8 eleventh graders randomly chosen. 4 times in the methodology were implemented in the first test were performed to identify the previous ideas of students; in the second laboratory guidelines and practices they were designed taking into account the levels of openness, then applying the same was done at the last moment and the corresponding qualitative analysis was developed. As a result it is evident that in the development of practical motivation and interest in the process was higher in students, which contributed to the development of certain scientific skills, the results of the post test were significant, it was possible to strengthen students the skills and understanding of concepts related to the topic of chemical reactions. The investigation can be concluded that laboratory practices conceived as a teaching strategy for teaching and learning of chemical reactions allowed the development of some scientific skills and a more meaningful learning of concepts associated with the topic in students.

Este artigo é o resultado de uma investigação realizada em 2012, cujo principal objetivo é usar os laboratórios como estratégia de ensino a partir do paradigma construtivista que promove a construção do conhecimento científico escola. A abordagem metodológica é a pesquisa qualitativa. A amostra do estudo foi composta de oito alunos do décimo primeiro grau, escolhidas aleatoriamente. quatro momentos na metodologia foram implementadas no primeiro teste foram realizados para identificar as ideias anteriores de estudantes; no segundo diretrizes laboratoriais e práticas foram concebidas tendo em conta os níveis de abertura, posteriormente, fez a sua aplicação e, no último momento a análise qualitativa correspondente foi estabelecida. Como resultado, tornou-se evidente que o desenvolvimento da motivação prática e interesse no processo foram maiores nos alunos, que contribuíram para o desenvolvimento de certas competências científicas. resultados pós-teste foram significativos, foi possível reforçar nos alunos as habilidades e compreensão de conceitos relacionados ao tema de reações químicas. A investigação pode-se concluir que as práticas de laboratório, concebida como uma estratégia de ensino para o ensino e aprendizagem de reações químicas, permitiu o desenvolvimento de algumas habilidades científicas e uma aprendizagem mais significativa de conceitos associados com o tema em estudantes.